Nariadenie vlády Slovenskej republiky o monitorovaní určitých látok a ich rezíduí v živých zvieratách a v produktoch živočíšneho pôvodu 320/2003 účinný od 01.01.2006

Príloha č. 1

k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

Zoznam preberaných a vykonávaných právnych aktov Európskych spoločenstiev

1. Smernica Rady 96/23/ES z 29. apríla 1996 o opatreniach na monitorovanie určitých látok a ich rezíduí ...

Aktu o podmienkach pristúpenia Slovenskej republiky a o úpravách zmlúv, na ktorých je založená ...

nariadenia Rady (ES) č. 806/2003 zo 14. apríla 2003 (Ú. v. EÚ L 122, 6. 5. 2003).

2. Rozhodnutie Komisie 97/747/ES z 27. októbra 1997 stanovujúce úrovne a frekvencie odberu vzoriek stanovené ...

3. Rozhodnutie Komisie 98/179/ES z 23. februára 1998, ktoré stanovuje podrobné pravidlá úradného ...

4. Rozhodnutie Komisie 2002/567/ES zo 14. augusta 2002, ktorým sa vykonáva smernica Rady 96/23/ES týkajúca ...

5. Nariadenie Európskeho parlamentu a Rady (ES) č. 882/2004 z 29. apríla 2004 o úradných kontrolách ...

Príloha č. 2 k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

ZOZNAM URČITÝCH LÁTOK V ŽIVÝCH ZVIERATÁCH A SKUPÍN REZÍDUÍ

SKUPINA A

LÁTKY S ANABOLICKÝM ÚČINKOM A NEPOVOLENÉ LÁTKY

1. stilbény, deriváty stilbénov a ich soli a estery,

2. antityreoidné látky,

3. steroidy,

4. laktóny kyseliny rezorcylovej vrátane zeranolu,

5. beta–agonisti,

6. látky uvedené v osobitnom predpise.1)

SKUPINA B

VETERINÁRNE LIEKY, LÁTKY, KTORÉ MÔŽU BYŤ POUŽITÉ NA VETERINÁRNE ÚČELY, A KONTAMINANTY

1. Antibakteriálne látky vrátane sulfónamidov a chinolínov

2. Iné veterinárne lieky

a) antihelminitiká,

b) antikokcidiká vrátane nitroimidazolov,

c) karbamáty a pyretroidy,

d) sedatíva,

e) nesteroidné protizápalové lieky (NPL),

f) ostatné farmakologicky aktívne látky.

3. Ostatné látky a kontaminanty prostredia

a) organochlórové zlúčeniny vrátane PCB,

b) organofosfáty,

c) chemické prvky,

d) mykotoxíny,

e) farbivá,

f) iné.

Príloha č. 3 k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

PLÁN DETEKCIE SKUPÍN REZÍDUÍ ALEBO LÁTOK PODĽA DRUHOV ZVIERAT A PRODUKTOV ŽIVOČÍŠNEHO PÔVODU ...

Skupina rezíduí alebo látok Hovädzí dobytok, ovce, kozy, ošípané, nepárnokopytníky Hydina ...

Príloha č. 4 k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

STRATÉGIA ODBERU VZORIEK

1. Plán kontroly rezíduí sa zameriava na skúmanie a zisťovanie príčin nebezpečenstiev rezíduí ...

2. Pri látkach zo skupiny A podľa prílohy č. 2 musí byť dohľad zameraný na zisťovanie nelegálneho ...

3. Pri látkach zo skupiny B podľa prílohy č. 2 musí byť dohľad zameraný najmä na kontrolu dodržiavania ...

a) maximálnych limitov rezíduí veterinárnych liekov uvedených v osobitnom predpise,2)

b) maximálnych limitov rezíduí pesticídov uvedených v osobitnom predpise,2)

c) monitorovania koncentrácie kontaminantov prostredia.

4. Ak pri predložení plánu kontroly rezíduí Slovenskej republiky Európskej komisii nemožno odôvodniť ...

Príloha č. 5 k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

ROZSAHY A FREKVENCIA ODBERU ÚRADNÝCH VZORIEK

Účelom tejto prílohy je ustanoviť minimálne počty zvierat, z ktorých sa musia odoberať vzorky. ...

ČASŤ A

HOVÄDZÍ DOBYTOK, OŠÍPANÉ, OVCE, KOZY A KONE

1. Hovädzí dobytok

Minimálny počet zvierat, ktoré sa každý rok kontrolujú na všetky druhy rezíduí a látok, sa ...

Skupina A: 0,25 % rozdelených takto:

1. jedna polovica vzoriek sa odoberá zo živých zvierat v chove; výnimočne sa môže 25 % vzoriek ...

2. jedna polovica vzoriek v skupine A sa odoberá na bitúnku.

Každá podskupina v skupine A podľa príloh č. 2 a 3 sa musí každý rok skontrolovať prostredníctvom ...

Skupina B: 0,15 % rozdelených takto:

1. 30 % vzoriek sa musí skontrolovať na látky zo skupiny B bodu 1,

2. 30 % vzoriek sa musí skontrolovať na látky zo skupiny B bodu 2,

3. 10 % vzoriek sa musí skontrolovať na látky zo skupiny B bodu 3.

Zostatok sa musí rozdeliť podľa situácie v Slovenskej republike.

2. Ošípané

Minimálny počet zvierat, ktoré sa každý rok kontrolujú na všetky druhy rezíduí a látok, sa ...

Skupina A: 0,02 %

Ak sa odoberajú vzorky zo zvierat na bitúnku, musia sa navyše vykonať analýzy napájacej vody, ...

Každá podskupina v skupine A sa musí každý rok skontrolovať prostredníctvom najmenej 5 % z celkového ...

Skupina B: 0,03 %

Musí sa dodržať rovnaký rozpis ako pri hovädzom dobytku. Zostatok sa rozdelí podľa situácie ...

3. Ovce a kozy

Minimálny počet zvierat, ktoré sa každý rok kontrolujú na všetky druhy rezíduí a látok, sa ...

Skupina A: 0,01 %

Každá podskupina v skupine A sa musí každý rok skontrolovať prostredníctvom najmenej 5 % z celkového ...

Skupina B: 0,04 %

Musí sa dodržať rovnaký rozpis ako pri hovädzom dobytku. Zostatok sa rozdelí podľa skúseností ...

4. Nepárnokopytníky

Počet vzoriek sa určí na základe identifikovaných problémov.

ČASŤ B

BROJLEROVÉ KURČATÁ, VYNESENÉ NOSNICE, MORKY, OSTATNÁ HYDINA

Vzorka pozostáva z jedného alebo viacerých zvierat v závislosti od požiadaviek analytických metód. ...

Minimálny počet vzoriek, ktorý sa každý rok odoberá z každej kategórie hydiny (brojlerové kurčatá, ...

Skupina A: 50 % z celkového počtu vzoriek

Ekvivalent jednej pätiny z týchto vzoriek sa musí odobrať na úrovni farmy.

Každá podskupina v skupine A sa musí každý rok skontrolovať prostredníctvom najmenej 5 % z celkového ...

Skupina B: 50 % z celkového počtu vzoriek

1. 30 % vzoriek sa musí skontrolovať na látky zo skupiny B bodu 1,

2. 30 % vzoriek sa musí skontrolovať na látky zo skupiny B bodu 2,

3. 10 % vzoriek sa musí skontrolovať na látky zo skupiny B bodu 3.

Zostatok sa rozdelí podľa situácie v Slovenskej republike.

ČASŤ C

PRODUKTY VODNÉHO HOSPODÁRSTVA

Produkty farmových chovov rýb

Jednou vzorkou je jedna alebo viac rýb podľa veľkosti rýb a požiadaviek analytickej metódy.

Musí sa dodržať nižšie uvedený rozsah a frekvencia odberu vzoriek v závislosti od produkcie rýb ...

Minimálny počet vzoriek, ktorý sa odoberá každý rok, musí byť najmenej jedna vzorka na 100 ton ...

Zisťované látky a vzorky vybrané na analýzu sa musia vyberať podľa pravdepodobného používania ...

Musí sa dodržať tento rozpis:

Skupina A: jedna tretina z celkového počtu vzoriek

Všetky vzorky sa musia odobrať na úrovni farmy z rýb vo všetkých fázach chovu vrátane konzumných ...

V prípade morského chovu, ak sú osobitne obťažné podmienky odberu vzoriek, možno odobrať namiesto ...

Skupina B: dve tretiny z celkového počtu vzoriek; odber vzoriek sa vykonáva

a) prednostne na farme z konzumných rýb, ktoré sú už pripravené na uvedenie na trh,

b) buď v spracovateľskej prevádzkarni, alebo na úrovni veľkoobchodu z čerstvých rýb s podmienkou, ...

Vo všetkých prípadoch sa vzorky odoberané na úrovni farmy odoberajú z najmenej 10 % registrovaných ...

Ostatné produkty vodného hospodárstva

Ak je predpoklad, že sa veterinárne lieky alebo chemikálie podávajú iným produktom vodného hospodárstva ...

ČASŤ D

MLIEKO

Kravské mlieko

A. Požiadavky na odber vzoriek

1. Každú úradnú vzorku musí odobrať veterinárny inšpektor príslušného orgánu veterinárnej ...

2. Vzorky možno odoberať

a) buď na úrovni farmy zo zberného tanku ako bazénové vzorky, alebo

b) na úrovni mliekarenského priemyslu predtým, ako sa vyprázdni cisterna.

3. Z uvedenej zásady vystopovateľnosti farmy pôvodu mlieka sa pripúšťa výnimka pre látky alebo ...

4. Vzorky sa musia odoberať len zo surového mlieka; veľkosť vzorky závisí od použitej analytickej ...

B. Rozsah a frekvencia odberu vzoriek

Ročný počet vzoriek je jedna vzorka na 15 000 ton ročnej produkcie mlieka s minimálnym počtom ...

a) 70 % vzoriek sa musí vyšetriť na prítomnosť rezíduí veterinárnych liekov; v tomto prípade ...

b) 15 % vzoriek sa musí testovať na prítomnosť rezíduí podľa prílohy č. 2 zo skupiny B bodu ...

c) zostatok (15 % vzoriek) sa musí rozdeliť podľa situácie v Slovenskej republike.

Mlieko ostatných druhov zvierat (ovce, kozy, nepárnokopytníky)

Počet vzoriek pre tieto druhy sa musí určiť podľa množstva produkcie a identifikovaných problémov. ...

ČASŤ E

VAJCIA

1. Slepačie vajcia

A. Požiadavky na odber vzoriek

1. Každú úradnú vzorku musí odobrať veterinárny inšpektor príslušného orgánu veterinárnej ...

2. Vzorky možno odoberať

a) buď na úrovni farmy nosníc, alebo

b) na úrovni triediarne a baliarne vajec.

3. Veľkosť vzorky je najmenej 12 alebo viac vajec podľa použitých analytických metód.

B. Rozsah a frekvencia odberu vzoriek

1. Počet vzoriek, ktorý sa musí odobrať každý rok, sa musí rovnať najmenej jednej vzorke na ...

2. Najmenej 30 % vzoriek sa musí odobrať z triediarní a baliarní, ktoré predstavujú najvýznamnejší ...

3. Musí sa dodržať tento rozpis:

a) 70 % vzoriek sa musí testovať na najmenej jednu látku uvedenú v prílohe č. 2 zo skupiny A bodu ...

b) 30 % vzoriek sa musí prideliť podľa situácie v Slovenskej republike a musí zahŕňať aj niektoré ...

2. Vajcia iných druhov hydiny

Počet vzoriek z týchto druhov sa určuje podľa množstva produkcie a identifikovaných problémov. ...

ČASŤ F

KRÁLIČIE MÄSO A ZVERINA Z VOĽNE ŽIJÚCEJ ZVERI A ZVERI Z FARMOVÝCH CHOVOV

1. Králičie mäso

A. Požiadavky na odber vzoriek

1. Jedna vzorka pozostáva z jedného alebo viacerých zvierat od jedného producenta v závislosti ...

2. Každú úradnú vzorku musí odobrať veterinárny inšpektor príslušného orgánu veterinárnej ...

3. Vzorky možno v závislosti od štruktúry produkcie králikov v Slovenskej republike odoberať

a) buď na úrovni farmy, alebo

b) na úrovni registrovaných bitúnkov ustanovených podľa § 31.

4. Bez toho, aby boli dotknuté iné ustanovenia tohto nariadenia, môžu sa odobrať aj dodatočné ...

B. Rozsah a frekvencia odberu vzoriek

1. Počet vzoriek, ktoré sa odoberajú každý rok, sa musí rovnať desiatim vzorkám na 300 ton ročnej ...

2. Musí sa dodržať tento rozpis podľa skupiny látok z prílohy č. 2:

a) skupina A: 30 % z celkového počtu vzoriek

70 % musí byť vyšetrených na látky zo skupiny A bodu 6,

30 % musí byť vyšetrených na látky zo skupiny A bodov 1 až 5.

b) skupina B: 70 % z celkového počtu vzoriek

30 % musí byť vyšetrených na látky zo skupiny B bodu 1,

30 % musí byť vyšetrených na látky zo skupiny B bodu 2,

10 % musí byť vyšetrených na látky zo skupiny B bodu 3.

3. Zostatok sa musí rozpísať podľa situácie v Slovenskej republike.

Zver z farmových chovov

A. Požiadavky na odber vzoriek

1. Veľkosť vzorky závisí od použitej analytickej metódy. Vzorky sa musia odobrať na úrovni spracovateľskej ...

2. Bez toho, aby boli dotknuté iné ustanovenia tohto nariadenia, môžu sa odobrať aj dodatočné ...

B. Rozsah a frekvencia odberu vzoriek

1. Počet vzoriek, ktoré sa každý rok odoberajú, sa musí rovnať najmenej 100 vzorkám.

2. Musí sa dodržať tento rozpis podľa skupiny látok z prílohy č. 2:

a) skupina A: 20 % z celkového počtu vzoriek; väčšina týchto vzoriek sa musí analyzovať na látky ...

b) skupina B: 70 % z celkového počtu vzoriek:

30 % musí byť skontrolovaných na látky zo skupiny B bodu 1,

30 % musí byť skontrolovaných na látky zo skupiny B bodu 2 písm. a) a b),

10 % musí byť skontrolovaných na látky zo skupiny B bodu 2 písm. c) a e),

30 % musí byť skontrolovaných na látky zo skupiny B bodu 3.

3. Zostatok (10 %) sa pridelí podľa skúseností v Slovenskej republike.

3. Voľne žijúca zver

A. Požiadavky na odber vzoriek

Veľkosť vzorky závisí od použitej analytickej metódy. Vzorky sa musia odobrať na úrovni spracovateľskej ...

B. Rozsah a frekvencia odberu vzoriek

Počet vzoriek, ktoré sa každý rok odoberajú, sa musí rovnať najmenej 100 vzorkám. Tieto vzorky ...

ČASŤ G

MED

A. Požiadavky na odber vzoriek

Veľkosť vzorky závisí od použitej analytickej metódy. Vzorky sa môžu odobrať v ktoromkoľvek ...

B. Rozsah a frekvencia odberu vzoriek

1. Počet vzoriek, ktoré sa každý rok odoberajú, sa musí rovnať najmenej desiatim vzorkám na ...

2. Musí sa dodržať tento rozpis:

a) skupina B bod 1 a skupina B bod 2 písm. c): 50 % z celkového počtu vzoriek,

b) skupina B bod 3 písm. a), skupina B bod 3 písm. b) a c): 40 % z celkového počtu vzoriek.

3. Zostatok (10 % vzoriek) sa pridelí podľa skúseností v Slovenskej republike. Osobitná pozornosť ...

Príloha č. 6 k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

ČASŤ A

Zoznam referenčných laboratórií Európskeho spoločenstva

1. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine A bodoch 1 až 4, skupine B bode 2 písm. d) a skupine ...

Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu (RIVM)

3720 BA Bilthoven

Holandsko

2. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine B bode 1 a skupine B bode 3 písm. e) a rezíduá ...

Laboratoires d ´études et de recherches sur les médicaments vétérinaires et les désinfectants

AFSSA-Site de Fougeres

BP 90203

Francúzsko

3. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine A bode 5 a skupine B bode 2 písm. a), b) a e)

Bundesamt für Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherheit (BVL)

Postfach 140162

D-53056 Bonn

4. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine B bode 2 písm. c) a skupine B bode 3 písm. a) až ...

Instituto Superiore di Sanita

I-00161-Roma.

ČASŤ B - Zrušená od 1. 1. 2006.

ČASŤ C

Zoznam referenčných laboratórií v Slovenskej republike

1. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine B bode 1, skupine B bode 2 písm. f), skupine B bode ...

ŠVÚ Dolný Kubín

Janoškova 1611/58

026 80 Dolný Kubín

2. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine B bode 3 písm. a) a b), skupine B bode 2 písm. ...

ŠVÚ Bratislava

Botanická č. 15

842 13 Bratislava

3. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine B bode 3 písm. c) a d), skupine B bode 2 písm. ...

ŠVÚ Košice

Hlinkova 1B

040 01 Košice

4. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine A bodoch 1, 3, 4 a 5

ŠVÚ Nitra

Akademická 3

949 01 Nitra

5. Pre rezíduá uvedené v prílohe č. 2 skupine B bode 3 písm. f (rádioaktivita)

Národné referenčné laboratórium pre rádiometriu a rádioekológiu

Štátny veterinárny a potravinový ústav

Akademická 3

949 01 Nitra

Príloha č. 7 k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

POŽIADAVKY NA ODBER ÚRADNÝCH VZORIEK NA MONITOROVANIE URČITÝCH LÁTOK A ICH REZÍDUÍ V ŽIVÝCH ...

Požiadavky podľa tejto prílohy sa vzťahujú na odber úradných vzoriek vrátane cielených kritérií. ...

1. Zodpovednosť

1.1.Veterinárny inšpektor

Veterinárni inšpektori1) musia byť poverení príslušným orgánom veterinárnej správy na odber, ...

1.2. Schválené laboratóriá [§ 2 ods. 2 písm. f) nariadenia]

a) Analýzy úradných vzoriek musia vykonávať výlučne laboratóriá schválené na úradnú kontrolu ...

b) Tieto laboratóriá musia preukazovať svoju kompetentnosť pravidelnou a úspešnou účasťou vo ...

2. Odber vzoriek

2.1. Základné hľadiská

a) Vždy, keď sa odoberajú úradné vzorky, musí byť ich odber nepredvídaný, nečakaný a nesmie ...

b) Odber vzoriek sa musí vykonávať v prevádzkarňach uvedených v bode 1 prílohy č. 4 vo variabilných ...

2.2. Stratégia odberu vzoriek

Plán kontroly rezíduí sa zameriava na

a) detekciu každého nelegálneho ošetrenia podľa § 2 ods. 2 písm. b),

b) kontrolu dodržiavania

1. maximálnych limitov rezíduí veterinárnych liekov uvedených v osobitnom predpise,5)

2. maximálnych limitov rezíduí pesticídov uvedených v osobitnom predpise5) a

3. prípustných množstiev kontaminantov prostredia,

c) skúmanie a odhaľovanie príčin prítomnosti rezíduí v potravinách živočíšneho pôvodu.

2.3. Odber vzoriek

2.3.1. Definície

2.3.1.1. Cielená vzorka

Cielená vzorka je vzorka, ktorá je odobratá v súlade so stratégiou odberu vzoriek uvedenou v bode ...

2.3.1.2. Vzorka v prípade podozrenia

Vzorka v prípade podozrenia je vzorka, ktorá sa odoberá

a) ako následok pozitívnych výsledkov vzoriek odobratých v súlade s požiadavkami podľa § 5 tohto ...

b) ako následok kontrol uvedených v § 11 tohto nariadenia,

c) ako požiadavka podľa § 24 tohto nariadenia.

2.3.1.3. Náhodná vzorka

Náhodná vzorka je vzorka, ktorá bola odobratá podľa štatistického výpočtu na to, aby poskytla ...

2.3.2. Cielený odber vzoriek na farme

2.3.2.1. Kritériá na výber cielenej vzorky

Farmy na odber vzoriek možno zvoliť s použitím miestnych znalostí alebo iných významných informácií, ...

a) indikácie o používaní farmakologicky aktívnych látok,

b) druhotné pohlavné znaky,

c) zmeny správania zvierat,

d) rovnaká úroveň vývoja v skupine zvierat rôzneho plemena alebo kategórie,

e) zvieratá s dobrou stavbou tela a s malým množstvom tuku.

2.3.2.2. Druh cielenej vzorky, ktorá sa odoberá

Na detekciu farmakologicky aktívnych látok sa odoberajú zodpovedajúce vhodné vzorky podľa ustanovení ...

2.3.3. Cielený odber vzoriek v prevádzkarňach prvotného spracovania

2.3.3.1. Kritériá na výber vzoriek

a) Pri posudzovaní tiel zvierat alebo živočíšnych produktov na odber vzoriek veterinárny inšpektor ...

1. pohlavie, vek, druh zvieraťa a systém chovu zvierat,

2. informácie o producentovi zvierat,

3. indikácie o používaní farmakologicky aktívnych látok,

4. bežná prax pri podávaní určitých farmakologicky aktívnych látok v príslušnom systéme produkčného ...

b) Pri odbere vzoriek treba predchádzať viacnásobnému odberu vzoriek od jedného producenta.

2.3.3.2. Druh odoberaných vzoriek

Na detekciu farmakologicky aktívnych látok sa odoberajú zodpovedajúce vhodné vzorky podľa ustanovení ...

2.4. Množstvo vzoriek

Minimálne množstvá vzoriek musia byť uvedené v národnom pláne kontroly rezíduí. Musia byť ...

2.5. Rozdelenie na podvzorky

Ak to nie je technicky nemožné, každá vzorka musí byť rozdelená najmenej na dve rovnocenné podvzorky, ...

2.6. Obaly (kontajnery) na vzorky

Vzorky sa musia odoberať do vhodných kontajnerov alebo obalov na zachovanie integrity vzoriek a ich ...

2.7. Záznam o odbere vzorky

a) Po každom postupe odberu vzoriek sa musí vykonať záznam. Veterinárny inšpektor musí v zázname ...

1. adresu príslušného orgánu veterinárnej správy,

2. meno inšpektora alebo jeho identifikačný kód,

3. úradné kódové číslo vzorky,

4. dátum odberu vzorky,

5. meno (názov) a adresu vlastníka alebo osoby zodpovednej za zvieratá alebo živočíšne produkty, ...

6. názov a adresu farmy, odkiaľ zvieratá pochádzali (ak sa vzorky odoberajú na farme),

7. registračné číslo prevádzkarne alebo veterinárne kontrolné alebo schvaľovacie číslo bitúnku, ...

8. identifikáciu zvieraťa alebo produktu,

9. druh zvieraťa,

10. druh (matricu) vzorky,

11. medikáciu počas posledných štyroch týždňov pred odberom vzorky (ak sa odoberala na farme), ...

12. látku alebo skupiny látok na vyšetrenie,

13. osobitné poznámky.

b) V závislosti od postupu odberu vzoriek sa vyhotovia kópie záznamu. Záznam o odbere a jeho kópie ...

2.8. Laboratórna žiadanka (správa)

a) Laboratórna žiadanka (správa) určená príslušným orgánom veterinárnej správy6) musí obsahovať ...

1. adresu príslušného orgánu veterinárnej správy,

2. meno inšpektora, ktorý odobral vzorky,

3. úradné kódové číslo vzorky,

4. dátum odberu vzorky,

5. živočíšny druh zvieraťa,

6. druh (matricu) vzorky,

7. látky alebo skupiny látok na vyšetrenie,

8. osobitné poznámky.

b) Táto žiadanka (správa) sa odovzdáva rutinnému laboratóriu spolu so vzorkami.

2.9. Preprava a skladovanie vzoriek

a) Plány kontroly rezíduí musia špecifikovať pre každú kombináciu analytu (matrica vzorky) vhodné ...

b) V prípade každého nedodržania požiadaviek plánu kontroly musí laboratórium bez meškania ...

Príloha č. 8 k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

ANALYTICKÉ METÓDY A INTERPRETÁCIA VÝSLEDKOV ANALÝZ ÚRADNÝCH VZORIEK

ČASŤ A

VŠEOBECNÉ POŽIADAVKY

1. Predmet a oblasť

Požiadavky tejto prílohy sa vzťahujú na analytické metódy, ktoré sa používajú na testovanie ...

Táto príloha sa nevzťahuje na látky, pre ktoré sú právnymi predpismi Slovenskej republiky a legislatívou ...

2. Analytické metódy

Úradné vzorky odobraté podľa tohto nariadenia sa musia analyzovať metódami, ktoré

a) sú dokumentované návodom testov, najlepšie podľa slovenskej technickej normy,1)

b) vyhovujú oddielu 2 časti B,

c) boli validované v súlade s postupmi opísanými v oddieli 3 časti B,

d) vyhovujú príslušnému minimu požadovaných pracovných limitov (MRPL), ktoré sú ustanovené ...

3. Minimum požadovaných pracovných limitov

Táto príloha sa bude meniť a dopĺňať tak, aby sa postupne ustanovilo minimum požadovaných pracovných ...

4. Kontrola kvality

Kvalita výsledkov analýz vzoriek odobratých v súlade s týmto nariadením sa musí zabezpečovať ...

5. Interpretácia výsledkov

Výsledok analýzy sa považuje za nezhodný, ak bol prekročený rozhodujúci limit konfirmačnej metódy ...

Ak je pre látku ustanovený povolený limit, rozhodujúcim limitom je koncentrácia, nad ktorou je ...

Ak nie je pre látku ustanovený žiadny povolený limit, rozhodujúci limit je najnižšia hladina ...

Pre látky uvedené v skupine A prílohy č. 2 je chyba α 1 % a menej. Pre ostatné látky je chyba ...

ČASŤ B

PRACOVNÉ KRITÉRIÁ, INÉ POŽIADAVKY A POSTUPY ANALYTICKÝCH METÓD

1. Definície pojmov

 1.1. Správnosťou sa rozumie blízkosť zhody medzi výsledkom skúšky a uznanou referenčnou hodnotou3). ...

1.2. Alfa (α) chybou sa rozumie pravdepodobnosť, že testovaná vzorka je zhodná, aj keď bola získaná ...

1.3. Analytom sa rozumie látka, ktorá má byť detekovaná, identifikovaná a/alebo kvantifikovaná, ...

1.4. Beta (ß) chybou sa rozumie pravdepodobnosť, že testovaná vzorka je skutočne nezhodná, aj ...

 1.5. Biasom sa rozumie rozdiel medzi predpokladaným výsledkom testu a uznanou referenčnou hodnotou3). ...

1.6. Kalibračným štandardom sa rozumie prostriedok na meranie, ktorý predstavuje kvantitu látky, ...

1.7. Certifikovaným referenčným materiálom (CRM) sa rozumie materiál, ktorý má presne stanovený ...

1.8. Co-chromatografiou sa rozumie postup, v ktorom je extrakt pred chromatografickým krokom (krokmi) ...

1.9. Porovnávacími štúdiami sa rozumie analyzovanie rovnakej vzorky rovnakou metódou na určenie ...

1.10. Konfirmačnou metódou sa rozumejú metódy, ktoré poskytujú úplnú alebo doplňujúcu informáciu ...

1.11. Rozhodujúcim limitom (CCα) sa rozumie limit, v ktorom a nad ktorým sa môže s chybou pravdepodobnosti ...

1.12. Detekčnou schopnosťou (CCß) sa rozumie najnižší obsah látky, ktorý môže byť vo vzorke ...

1.13. Fortifikovaným materiálom vzorky sa rozumie vzorka obohatená známym množstvom detekovaného ...

1.14. Medzilaboratórnymi porovnaniami sa rozumie organizácia, vykonanie a vyhodnotenie testov tej ...

1.15. Interným štandardom (IS) sa rozumie látka, ktorá nie je neobsiahnutá vo vzorke, s fyzikálno-chemickými ...

1.16. Laboratórnou vzorkou sa rozumie vzorka pripravená na zaslanie do laboratória za účelom skúmania ...

1.17. Úrovňou záujmu sa rozumie koncentrácia látky alebo analytu vo vzorke, ktorá je dôležitá ...

1.18. Minimom požadovaných pracovných limitov (MRPL) sa rozumie najmenší obsah analytu vo vzorke, ...

1.19. Pracovnými charakteristikami sa rozumie prevádzková kvalita, ktorá sa môže prisúdiť analytickej ...

1.20. Pracovnými kritériami sa rozumejú požiadavky na pracovné kritériá, podľa ktorých možno ...

1.21. Stanoveným limitom sa rozumie maximálny limit rezíduí, maximálna úroveň alebo iná maximálna ...

 1.22. Presnosťou sa rozumie blízkosť zhody medzi nezávislými výsledkami testu získanými za určených ...

1.23. Skúškou spôsobilosti sa rozumie analyzovanie rovnakej vzorky, ktoré dovoľuje laboratóriám ...

1.24. Kvalitatívnou metódou sa rozumie analytická metóda, ktorá identifikuje látku na základe ...

1.25. Kvantitatívnou metódou sa rozumie analytická metóda, ktorá určuje množstvo alebo hmotnostný ...

1.26. Slepým pokusom sa rozumie úplný analytický postup aplikovaný bez dávky testu alebo použitím ...

1.27. Výťažnosťou sa rozumie percento pravdivej koncentrácie látky získanej počas analytického ...

1.28. Referenčným materiálom sa rozumie materiál, ktorého jedna alebo viac vlastností sú potvrdené ...

 1.29. Opakovateľnosťou sa rozumie presnosť za opakovateľných podmienok3).

1.30. Opakovateľnými podmienkami sa rozumejú podmienky, keď sú nezávislé výsledky testu získané ...

 1.31. Reprodukovateľnosťou sa rozumie presnosť za reprodukovateľných podmienok3).

 1.32. Reprodukovateľnými podmienkami sa rozumejú podmienky, keď sú výsledky testu získané rovnakou ...

1.33. Robustnosťou sa rozumie schopnosť analytickej metódy prijať zmeny experimentálnych podmienok, ...

1.34. Slepou vzorkou sa rozumie úplný analytický postup použitý v dávke testu odobratej zo vzorky, ...

1.35. Screeningovou metódou sa rozumejú metódy, ktoré sa používajú na detekciu prítomnosti látky ...

1.36. Vnútrolaboratórnou validáciou sa rozumie analytické štúdium zahŕňajúce jediné laboratórium, ...

1.37. Špecifickosťou sa rozumie schopnosť metódy rozoznať meraný analyt od ostatných látok. ...

1.38. Štandardným prídavkom sa rozumie postup, pri ktorom je vzorka rozdelená do dvoch (alebo viacerých) ...

1.39. Štandardným analytom sa rozumie analyt so známym a certifikovaným obsahom a čistotou používaný ...

1.40. Látkou sa rozumie hmota s presnou alebo definovanou štruktúrou a jej metabolity.

1.41. Dávkou testu sa rozumie kvantita materiálu zo vzorky testu, na ktorej sa uskutočňuje test ...

1.42. Vzorkou testu sa rozumie vzorka pripravená z laboratórnej vzorky, z ktorej sa odoberá dávka ...

1.43. Pravdivosťou sa rozumie blízkosť zhody medzi priemernou hodnotou získanou z veľkých sérií ...

1.44. Jednotkami sa rozumejú jednotky podľa slovenskej technickej normy.4)

1.45. Validáciou sa rozumie potvrdenie vyšetrením a poskytnutie skutočného dôkazu, že príslušné ...

1.46. Vnútrolaboratórnou reprodukovateľnosťou sa rozumie presnosť získaná v tom istom laboratóriu ...

2. Pracovné kritériá a iné požiadavky na analytické metódy

Analytické metódy alebo kombinácie metód iné, ako sú opísané nižšie, sa môžu používať ...

2.1. Všeobecné požiadavky

2.1.1. Manipulácia so vzorkami

Vzorky majú byť získavané, manipulované a spracované takým spôsobom, aby bola maximálna možnosť ...

2.1.2. Vykonávanie testov

2.1.2.1. Výťažnosť

Počas analýzy vzoriek má byť určená výťažnosť pre každú skupinu vzoriek, ak sa používa ...

2.1.2.2. Špecifickosť

Metóda má byť schopná rozlíšiť medzi analytom a ostatnými látkami za experimentálnych podmienok. ...

2.2. Screeningové metódy

Na screeningové účely sa môžu používať len tie analytické metódy, pri ktorých sa môže preukázať ...

2.3. Konfirmačné metódy pre organické rezíduá a kontaminanty

Konfirmačné metódy pre organické rezíduá a kontaminanty poskytnú informáciu o chemickej štruktúre ...

Na identifikáciu rezíduí alebo kontaminantov pre uvedené skupiny látok sa považujú za vhodné ...

Tabuľka 1

Vhodné konfirmačné metódy pre organické rezíduá alebo kontaminanty

Meracia technika Látky prílohy 1 96/23/ES Limitácie LC alebo GC s hmotnostnou spektrometrickou ...

2.3.1. Všeobecné pracovné kritériá a požiadavky

Konfirmačné metódy majú poskytovať informáciu o chemickej štruktúre analytu. Ak viac ako jedna ...

Kde je v metóde zaužívané, pridá sa na začiatku extrakcie k dávke testu vhodný interný štandard. ...

Ak sa nemôže použiť vhodný interný štandard, identifikácia analytu musí byť potvrdená co-chromatografiou. ...

Referenčné alebo fortifikované materiály obsahujúce známe množstvo analytu buď blízko povoleného ...

2.3.2. Dodatočné pracovné kritériá a iné požiadavky na kvantitatívne analytické metódy

2.3.2.1. Pravdivosť kvantitatívnych metód

V prípade opakovaných analýz certifikovaného referenčného materiálu direktívne rozsahy pre odchýlku ...

Tabuľka 2

Minimálna pravdivosť kvantitatívnych metód

Hmotnostný zlomok Rozsah 1 ug/kg až 10 ug/kg -30 % až + 10 % >=10 ug/kg -20 % až + 10 % ...

Ak nie je prístupný taký referenčný materiál, je prijateľné, že pravdivosť meraní je hodnotená ...

2.3.2.2. Presnosť kvantitatívnych metód

Vnútrolaboratórny variačný koeficient (CV) pre opakované analýzy referenčného alebo fortifikovaného ...

CV=2(1-0,5log C),

kde C je hmotnostný zlomok vyjadrený ako exponent 10 (napríklad 1mg/g = 103). Príklady sú uvedené ...

Tabuľka 3

Príklady reprodukovateľnosti CV pre kvantitatívne metódy v rozsahu hmotnostných zlomkov

Hmotnostný zlomok Reprodukovateľnosť (CV) 1 ug/kg (*) 10 ug/kg (*) 100 ug/kg 23 1 000 ug/kg ...

(*) Pre hmotnostné zlomky nižšie ako 100 ug/kg dáva Horwitzova rovnica neprijateľne vysoké hodnoty. ...

Pre analýzy vykonávané za opakovateľných podmienok vnútrolaboratórny CV by mal byť typicky medzi ...

V prípade látok so stanoveným prípustným limitom metóda musí dosiahnuť reprodukovateľnosť ...

2.3.3. Pracovné kritériá a iné požiadavky na hmotnostnú spektrometrickú detekciu

Hmotnostné spektrometrické metódy sú vhodné ako konfirmačné metódy len na základe buď on-line, ...

2.3.3.1. Chromatografická separácia

Pri GC-MS sa chromatografická plynová separácia vykonáva za použitia kapilárnych kolón. Pri LC-MS ...

2.3.3.2. Hmotnostná spektrometrická detekcia

Hmotnostná spektrometrická detekcia sa vykonáva použitím MS techník ako záznam celého hmotnostného ...

Záznam celého hmotnostného spektra (full scan): Ak sa vykonáva hmotnostná spektrometrická determinácia ...

SIM: Ak sa vykonáva hmotnostná spektrometrická determinácia fragmentografiou, molekulárny ión ...

Záznam celého hmotnostného spektra (full scan) a SIM: Relatívne intenzity detekovaných iónov vyjadrené ...

Tabuľka 4

Maximálne povolené tolerancie pre relatívne iónové intenzity použitím rozsahu spektrometrických ...

Relatívna intenzita ( % bázy píku) EI-GC-MS CI-GC-MS, GC-MSn, LC-MS, LC-MSn > 50 % ± 10 % ± ...

Interpretácia údajov hmotnostného spektra: Relatívne intenzity rozpoznávacích iónov a/alebo prekurzorov/produktov ...

Záznam celého hmotnostného spektra (full scan): Ak sa zaznamenáva celé hmotnostné spektrum v jednotnej ...

SIM: Ak sú hmotnostné fragmenty merané pomocou iných full scan techník, na interpretáciu výsledkov ...

a) má sa merať najmenej jeden iónový ukazovateľ,

b) všetky relevantné iónové ukazovatele majú spĺňať vyššie uvedené kritériá,

c) na dosiahnutie minimálneho počtu identifikačných bodov je možné kombinovať maximálne tri ...

Tabuľka 5

Vzťah medzi rozmedzím skupín hmotnostných fragmentov a dosiahnutými identifikačnými bodmi

MS technika Identifikačné body získané na ión Hmotnostná spektrometria s nízkym rozlíšením ...

Poznámky:

(1) Každý ión môže byť počítaný len raz.

(2) GC-MS, ktorá využíva elektrónovú ionizáciu nárazom, sa považuje za rozdielnu techniku oproti ...

(3) Za účelom zvýšenia počtu identifikačných bodov sa môžu použiť rôzne analyty, len ak ...

(4) Pre všetky látky zo skupiny A prílohy 1 Smernice 96/23/ES, ak sa použije jeden z analytických ...

(5) Prechodné produkty zahŕňajú dcérske a pradcérske produkty.

Tabuľka 6

Príklady počtu identifikačných bodov získaných z rozsahu techník a ich kombinácií

(n = celé číslo)

Technika(y) Počet iónov Identifikačné body GC-MS (EI alebo CI) N n GC-MS (EI a CI) 2(EI) ...

2.3.4. Pracovné kritériá a iné požiadavky na chromatografiu spojenú s infračervenou detekciou

Adekvátne píky: Adekvátne píky sú absorbčné maximá kalibračných štandardov v infračervenom ...

2.3.4.1. Infračervená detekcia

Absorbčné maximum: má byť vo vlnočte v pásme 4 000-500 cm-1.

Intenzita absorbcie: nemá byť menej ako buď:

a) špecifická molárna absorbcia 40 so zreteľom na základnú líniu píku, alebo

b) relatívna absorbancia 12,5 % z absorbancie najintenzívnejšieho píku v oblasti 4 000-500 cm-1,

ak sú merané obidva so zreteľom na nulovú absorbanciu a 5 % absorbancie najintenzívnejšieho píku ...

Poznámka:

Aj keď adekvátne píky podľa písmena a) majú mať prednosť pred teoretickým aspektom, píky podľa ...

Počet píkov v infračervenom spektre pri analytoch, ktorých frekvencie korešpondujú s adekvátnym ...

2.3.4.2. Interpretácia údajov infračerveného spektra

Absorbcia má byť prítomná vo všetkých oblastiach spektra analytu, ktoré korešponduje s adekvátnym ...

2.3.5. Pracovné kritériá a iné požiadavky na determináciu analytu použitím LC s inými detekčnými ...

2.3.5.1. Chromatografická separácia

Ak je dostupný vhodný materiál na tento účel, má sa použiť interný štandard. Najlepšie ak ...

2.3.5.2. Záznam celého hmotnostného spektra (full scan) UV/VIS detekcia

Musia byť splnené pracovné kritériá pre LC metódy.

Absorbčné maximum spektra analytu sa má pri rovnakej vlnovej dĺžke rovnať kalibračnému štandardu ...

2.3.5.3. Pracovné kritériá pre fluorimetrickú detekciu

Musia byť splnené pracovné kritériá pre LC metódy.

Používa sa pre molekuly, ktoré vykazujú natívnu fluorescenciu, a pre molekuly, ktoré vykazujú ...

Najbližšie maximum píku v chromatograme má byť oddelené od určeného píku analytu najmenej jedným ...

2.3.5.4. Pracovné kritériá na určenie analytu LC imunogramom

LC imunogram nie je vhodný na použitie ako konfirmačná metóda.

Musia byť splnené príslušné kritériá pre LC.

Vopred definované kontrolné parametre kvality, napríklad nešpecifické väzby, relatívne väzby ...

Imunogram má byť zostavený najmenej z piatich frakcií.

Každá frakcia má byť menej než polovica šírky píku.

Frakcia s maximálnym obsahom analytu má byť rovnaká pre podozrivú vzorku, nezhodnú kontrolnú ...

2.3.5.5. Determinácia analytu použitím UV/VIS detekcie (jednotná vlnová dĺžka)

LC s UV/VIS detekciou (jednotná vlnová dĺžka) nie je vhodná na použitie ako konfirmačná metóda. ...

Najbližšie maximum píku v chromatograme má byť oddelené od určeného píku analytu najmenej jedným ...

2.3.6. Pracovné kritériá a iné požiadavky na determináciu analytu 2-D TLC spojenú so spektrometrickou ...

Dvojdimenzionálna HPTLC a co-chromatografia sú záväzné.

Hodnoty RF analytu sa musia zhodovať s RF hodnotami štandard ± 5 %.

Vizuálny vzhľad analytu má byť nerozoznateľný od štandardu.

Pre body rovnakej farby má byť oddelený stred najbližšieho bodu od stredu bodu analytu najmenej ...

Spektrum analytu nemá byť vizuálne odlišné od spektra štandardu, ako je opísané pri full scan ...

V prípade použitia vyhľadávacieho systému knižnice počítača a porovnateľného píku porovnanie ...

2.3.7. Pracovné kritériá a iné požiadavky na determináciu analytu pomocou GC v kombinácii s detektorom ...

Ak je dostupný vhodný materiál na tento účel, má sa použiť interný štandard. Najlepšie ak ...

2.4. Konfirmačné metódy pre prvky

Konfirmačné metódy pre chemické prvky majú byť založené na spôsobe jednoznačnej identifikácie ...

Na identifikáciu chemických prvkov sa považujú za vhodné tieto metódy alebo kombinácie metód: ...

Tabuľka 7

Vhodné konfirmačné metódy pre chemické prvky

Technika Meraný parameter Diferenciálna pulzná anodická stripová voltametria elektrický signál ...

2.4.1. Všeobecné pracovné charakteristiky a iné požiadavky na konfirmačné metódy

Referenčný alebo fortifikovaný materiál s obsahom známeho množstva analytu v blízkosti buď povoleného ...

Vo všeobecnosti si väčšina analytických techník vyžaduje kompletný rozklad organickej matrice ...

Čo sa týka kalibrácie, tá je externá alebo založená na metóde štandardného prídavku, treba ...

2.4.2. Dodatočné pracovné kritériá a iné požiadavky na kvantitatívne analytické metódy

2.4.2.1. Pravdivosť kvantitatívnych analytických metód

V prípade opakovaných analýz certifikovaného referenčného materiálu pre prvky odchýlka experimentálne ...

2.4.2.2. Presnosť kvantitatívnych metód

V prípade opakovanej analýzy vzorky vzorka za vnútrolaboratórnych podmienok reprodukovateľnosti, ...

Tabuľka 8

CV pre kvantitatívne metódy v rozmedzí hmotnostných zlomkov prvku

Hmotnostný zlomok CV ( %) >=10 ug/kg až 100 ug/kg 20 >100 ug/kg až 1000 ug/kg 15 >=1 000 ug/kg ...

2.4.3. Špecifické požiadavky na diferenciálnu pulznú anodickú stripovú voltametriu (DPASV)

Najdôležitejšia je úplná deštrukcia organickej matrice vo vzorkách pred DPASV. Vo voltamogramoch ...

2.4.4. Špecifické požiadavky na atómovú absorbčnú spektrometriu (AAS)

Metóda je v podstate monoprvková, a preto si vyžaduje optimalizáciu experimentálnych nastavení ...

2.4.4.1. Špecifické požiadavky pre plameňovú AAS

Nastavenia prístroja optimalizovať pre každý prvok. Má sa skontrolovať hlavne zloženie plynu ...

2.4.4.2. Špecifické požiadavky na AAS s grafitovou pieckou

Kontaminácia v laboratóriu často ovplyvňuje správnosť, ak sa pracuje v ultrastopových hladinách ...

Práca za podmienok izotermálnej atomizácie [napríklad priečny ohrev grafitovej skúmavky s integrovaním ...

2.4.5. Špecifické požiadavky na atómovú absorbčnú spekrotometriu s generovaním hydridov

Organické zlúčeniny s obsahom prvkov ako arzén, bizmut, germánium, olovo, antimón, selén, cín ...

Tvorba arzénu v roztoku kyseliny chlorovodíkovej s NaBH4 závisí od oxidačného stupňa arzénu ...

2.4.6. Špecifické požiadavky na atómovú absorbčnú spektrometriu s generáciou studenej pary

Studená para sa používa len v prípade ortuti. Z dôvodu odparovania a adsorbčných strát elementárnej ...

Organické zlúčeniny s obsahom ortuti vyžadujú oxidačný rozklad, aby sa získali výsledky celkového ...

Práca s prietokovými injekčnými technikami je výhodná. Pre nižšie rozhodujúce limity sa odporúča ...

2.4.7. Špecifické požiadavky na emisnú atómovú spektrometriu s indukčne viazanou plazmou (ICP-AES) ...

Atómová emisná spektrometria s indukčne viazanou plazmou (10) je multiprvková metóda, ktorá umožňuje ...

Výber vlnových dĺžok na meranie emisie z analytov je vhodný pre koncentrácie prvkov, ktoré majú ...

2.4.8. Špecifické požiadavky na indukčne viazanú hmotnostnú spekrometriu (ICP-MS)(11)

Určenie stopových prvkov strednej molekulovej hmotnosti ako chróm, meď a nikel môže byť predmetom ...

Pre ICP-MS merania sa vyžaduje úplný rozklad organickej matrice vzorky. Ako pri AAS po rozpustení ...

Pre prvky, ktoré majú byť určené, sa vylúčia interferencie vhodným výberom špecifických analytických ...

3. Validácia

Validácia má dokázať, že analytické metódy sú v zhode s kritériami príslušných pracovných ...

Rôzne kategórie metód si vyžadujú rôzne kontrolné ciele. Nasledujúca tabuľka určuje pracovné ...

Tabuľka 9

Klasifikácia analytických metód pracovnými charakteristikami, ktoré majú byť určené

    Rozhodujúci limit CC β Rozhodujúci limit CC α Pravdivosť/ výťažnosť Presnosť ...

S = screeningová metóda, C = konfirmačná metóda, + determinácia je povinná

3.1. Validačné postupy

Táto kapitola poskytuje príklady a/alebo odkazy pre validačné postupy analytických metód. Môžu ...

Validácia sa môže tiež vykonať vedením interlaboratórnych štúdií podľa Codex Alimentarius, ...

1. ustanovenia všeobecných pracovných charakteristík nezávislých od použitého modelu validácie ...

2. viac špecifických model-závislých postupov, ako sú opísané v tabuľke 10.

Tabuľka 10

Model-nezávislé a model-závislé pracovné parametre

Validácia Model-nezávislé pracovné charakteristiky Model-závislé pracovné charakteristiky ...

3.1.1. Model-nezávislé pracovné charakteristiky

Bez ohľadu na vybraný validačný prístup majú byť určené nasledujúce pracovné chakteristiky. ...

3.1.1.1. Špecifickosť

Pre analytické metódy je dôležitý potenciál rozlíšenia medzi analytom a blízko príbuznými ...

Z toho dôvodu majú byť vybraté interferujúce látky a majú byť analyzované príslušné slepé ...

a) vybrať rozsah chemicky príbuzných zložiek (metabolity, deriváty atď.) alebo iných látok, ...

b) analyzovať vhodný počet slepých vzoriek (n ≥20) a kontrolovať všetky interferencie,

c) (signály, píky, stopové ióny) v oblasti záujmu, v ktorej sa očakáva eluovanie cieľového ...

d) dodatočne fortifikovať reprezentatívne slepé vzorky príslušnou koncentráciou látok, ktoré ...

e) po analýze preskúmať, či

f) prítomnosť môže viesť k falošnej identifikácii,

g) je identifikácia cieľového analytu brzdená prítomnosťou jednej alebo viacerých interferencií ...

h) je obzvlášť ovplyvnená kvantifikácia.

3.1.1.2. Pravdivosť

V tejto časti je opísané určenie pravdivosti (zložka správnosti). Pravdivosť môže byť potvrdená ...

a) analyzovať šesť replikátov CRM v súlade s návodom metódy,

b) určiť koncentráciu prítomného analytu v každej vzorke replikátov,

c) vypočítať pre tieto koncentrácie priemer, smerodajnú odchýlku a variačný koeficient (%),

d) vypočítať pravdivosť vydelením určenej priemernej koncentrácie certifikovanou hodnotou (meranej ...

Pravdivosť ( %) = priemerná detekovaná výťažnosť korigovaná koncentráciou x 100/ certifikovaná ...

Ak nie je dostupný CRM, namiesto správnosti môže sa určiť výťažnosť, ako je opísané v 4.1.2.1. ...

3.1.1.3. Použiteľnosť/robustnosť (menšie zmeny)

Tieto štúdie využívajú úmyselné zavedenie malých primeraných obmien laboratóriom a sledovanie ...

Predvyšetrovacie štúdie sa uskutočňujú výberom faktorov predbežnej úpravy vzorky, čistenia ...

1. Identifikovať možné faktory, ktoré môžu ovplyvniť výsledok.

2. Mierne meniť každý faktor.

3. Uskutočniť test robustnosti použitím prístupu podľa Youdena (15)(16). (V tomto bode možno ...

4. Kde sa nájde faktor, ktorý významne ovplyvňuje výsledok, riadiť ďalšie pokusy tak, aby sa ...

5. Faktory, ktoré významne ovplyvňujú výsledky, majú byť jasne identifikované v protokole metódy. ...

Základnou myšlienkou nie je štúdium jednej zmeny v čase, ale zavedenie niekoľkých variácií ...

Je možné vybrať podskupinu ôsmich týchto kombinácií, ktoré majú rovnováhu medzi veľkými ...

Tabuľka 11

Experimentálny projekt na štúdium robustnosti (menšie zmeny)

Hodnota faktora F Kombinácia počtu determinácií 1 2 3 4 5 6 7 8 A/a A A A A a a ...

Pre výpočet pozri príklady testovania robustnosti v 3.3.

3.1.1.4. Stabilita

Bolo pozorované, že nedostatočná stabilita analytu alebo zložiek matrice vo vzorke počas skladovania ...

Stabilita analytu v roztoku

1. Pripraviť čerstvé zásobné roztoky analytu(ov) a riediť, ako je určené návodom testu, aby ...

2. Merať obsah analytu v čerstvo pripravenom roztoku podľa návodov testu.

3. Rozdeliť primerané objemy do vhodných nádob, označiť a skladovať podľa schémy.

Tabuľka 12

Schéma na určenie stability analytu v roztoku

-20 °C + 4°C + 20 °C Tma 10 častí 10 častí 10 častí Svetlo 10 častí ...

1. Zvolená doba skladovania môže byť jeden, dva, tri a štyri týždne alebo dlhšie, ak to je potrebné, ...

2. Výpočet koncentrácie analytu(ov) v dávke sa má vykonať tak, že 100 % je roztok čerstvo pripraveného ...

Zostávajúci analyt ( %) = Ci x 100/Cčerstvý

Ci = koncentrácia v čase merania

Cčerstvý = koncentrácia čerstvého roztoku

Stabilita analytu(ov) v matrici

1. Vždy, keď je to možné, majú sa použiť zaslané vzorky. Ak nie je dostupný zaslaný materiál, ...

2. Ak je dostupný zaslaný materiál, stanoviť koncentráciu v materiáli, kým je čerstvý. Ďalšie ...

3. Ak nie je dostupný zaslaný materiál, zobrať slepý materiál a zhomogenizovať ho. Rozdeliť ...

3.1.1.5. Kalibračné krivky,

Ak sa kalibračné krivky používajú na kvantifikáciu,

a) na zostrojenie krivky sa má použiť najmenej päť úrovní (vrátane nuly),

b) má byť charakterizovaný pracovný rozsah krivky,

c) majú byť charakterizované matematický vzorec krivky a test dobrej zhody údajov krivky,

d) má byť charakterizovaná prípustnosť rozsahov pre parametre krivky.

Ak je potrebná sériová kalibrácia založená na štandardnom roztoku, má byť vyjadrená prípustnosť ...

3.1.2. Obvyklé validačné postupy

Výpočet údajov v súlade s obvyklými metódami si vyžaduje realizáciu niekoľkých individuálnych ...

3.1.2.1. Výťažnosť

Ak nie je dostupný CRM, výťažnosť sa určuje skúškami za použitia fortifikovanej slepej matrice, ...

a) vybrať 18 častí slepého materiálu a fortifikovať šesť častí, každú 1, 1,5 a dvojnásobkom ...

b) analyzovať vzorky a vypočítať koncentráciu prítomnú v každej vzorke,

c) použitím doleuvedenej rovnice vypočítať výťažnosť pre každú vzorku,

d) vypočítať priemernú výťažnosť a CV zo šiestich výsledkov v každej úrovni,

e) % výťažnosti = 100 x nameraný obsah/fortifikačná úroveň.

Táto obvyklá metóda determinácie výťažnosti je variantom metódy štandardného prídavku opísanej ...

- je vzorka považovaná za slepú vzorku namiesto vzorky na analýzu,

- sa predpokladá, že výťažok (1) a výťažnosť (2) sú rovnaké pre obe časti testu,

- testované vzorky majú rovnakú hmotnosť a extrakty rovnaký objem,

- množstvo kalibračného štandardu, ktorý sa pridá do druhej (s prídavkom) časti testu, je vyjadrený ...

- x1 je nameraná hodnota pre blank a x2 nameraná hodnota pre druhú (s prídavkom) časť testu,

- potom % výťažnosti = 100 (x2 – x1)/XADD

Ak sa nedosiahne ktorákoľvek z uvedených podmienok alebo je predpoklad, že sa nedosiahne, potom ...

Vysvetlivky

(1) Výťažok: tá časť hmoty analytu obsiahnutá vo vzorke, ktorá je prítomná vo finálnom extrakte. ...

(2) Výťažnosť (tu): tá časť hmoty analytu pridaná k vzorke, ktorá je prítomná vo finálnom ...

3.1.2.2. Opakovateľnosť

1. Pripraviť sadu vzoriek rovnakých matríc, fortifikovať analytom, aby sa získali koncentrácie ...

2. V každej hladine analýzy sa má pracovať najmenej so šiestimi replikátmi.

3. Analyzovať vzorky.

4. Vypočítať koncentráciu zistenú pre každú vzorku.

5. Zistiť priemernú koncentráciu, smerodajnú odchýlku a variačný koeficient ( %) fortifikovaných ...

6. Opakovať tieto kroky pri najmenej dvoch iných príležitostiach.

7. Vypočítať súhrnné priemerné koncentrácie a CV pre fortifikované vzorky.

3.1.2.3. Vnútrolaboratórna reprodukovateľnosť

1. Pripraviť sadu vzoriek špecifického materiálu testu (rovnakých alebo rôznych matríc) fortifikovaných ...

2. V každej hladine analýzy sa má pracovať najmenej so šiestimi replikátmi.

3. Ak je to možné, opakovať tieto kroky pri najmenej dvoch iných príležitostiach s rôznymi operátormi ...

4. Analyzovať vzorky.

5. Vypočítať koncentráciu zistenú pre každú vzorku.

6. Zistiť priemernú koncentráciu, smerodajnú odchýlku a variačný koeficient ( %) fortifikovaných ...

3.1.2.4. Reprodukovateľnosť

Ak bola overená reprodukovateľnosť, laboratóriá sa môžu zúčastňovať na porovnávacích štúdiách ...

3.1.2.5. Rozhodujúci limit (CCα)

Rozhodujúci limit má byť zavedený podľa požiadaviek na identifikáciu alebo identifikáciu a kvantifikáciu, ...

V prípade látok, pre ktoré nie je ustanovený povolený limit, CCα môže byť stanovené:

a) buď postupom kalibračnej krivky podľa slovenskej technickej normy8)(tu sa počíta ako kritická ...

b) analyzovaním najmenej 20 slepých materiálov na matricu, aby bolo možné vypočítať pomer signálu ...

V prípade látok s ustanoveným povoleným limitom CCα môže byť stanovené

a) buď postupom kalibračnej krivky podľa slovenskej technickej normy8) (tu sa počíta ako kritická ...

b) analyzovaním najmenej 20 slepých materiálov na matricu, fortifikovaných analytom(mi) v limite. ...

3.1.2.6. Detekčná schopnosť (CCß)

Detekčná schopnosť sa určí podľa požiadaviek na screening, identifikáciu alebo identifikáciu ...

V prípade látok s ustanoveným povoleným limitom CCß môže byť stanovené

a) postupom kalibračnej krivky podľa slovenskej technickej normy8) (tu sa počíta ako najnižšia ...

b) analyzovaním najmenej 20 slepých materiálov na matricu, fortifikovaných analytom(mi) v rozhodujúcom ...

c) kde nie sú dostupné kvantitatívne výsledky, detekčná schopnosť sa môže určiť vyšetrením ...

V prípade látok, pre ktoré bol ustanovený detekčný limit CCß, môže byť stanovené

a) buď postupom kalibračnej krivky podľa slovenskej technickej normy8) (tu sa počíta ako najnižšia ...

b) analyzovaním najmenej 20 slepých materiálov na matricu, fortifikovaných analytom(mi) v rozhodujúcom ...

3.1.2.7. Robustnosť (väčšie zmeny)

Analytické metódy by mali byť testované za rôznych pokusných podmienok, ktoré zahŕňajú napríklad ...

3.1.3. Validácia podľa alternatívnych modelov

Ak sa používajú alternatívne validačné postupy, vo validačnom protokole sa uvedie základný ...

3.1.3.1. Experimentálny plán

Experimentálny plán má byť navrhnutý v závislosti od počtu rôznych druhov a rôznych faktorov ...

Príklad:

1. Niektoré analyty sa môžu vyšetrovať súbežne analytickou metódou, ktorá má byť validovaná. ...

2. Boli identifikované zmeny vedúcich faktorov (A a B). Vedúce faktory tvoria základ, na ktorom ...

3. Vybrané faktory sa menia v dvoch hladinách (označené ako buď + alebo -).

Tabuľka 13

Príklady faktorov, ktoré sa považujú za dôležité pri validačnom postupe

Pohlavie zvieraťa (faktor 1) Plemeno (faktor 2) Transportné podmienky (faktor 3) Podmienky skladovania ...

Tabuľka 14

Možný skúšobný plán pre uvedený príklad

Druh Faktor 1 Faktor 2 Faktor 3 Faktor 4 Faktor 5 Faktor 6 Faktor 7 Č. vzorky A + + + ...

Druh Faktor 1 Faktor 2 Faktor 3 Faktor 4 Faktor 5 Faktor 6 Faktor 7 Č. vzorky B + + + ...

Každá vzorka (každá hladina kombinácie faktora) má byť obohatená štyrmi rôznymi koncentráciami ...

Výsledky z týchto 80 meraní možno vypočítať (13)(14).

Výťažnosť

1. opakovateľnosť per úroveň koncentrácie (sir),

2. vnútrolaboratórna reprodukovateľnosť per úroveň koncentrácie (sir),

3. rozhodujúci limit (CCα),

4. detekčná schopnosť (CCß),

5. silová krivka (miera ß chyby oproti koncentrácii),

6. robustnosť väčších zmien, robustnosť menších zmien môže byť určená podľa odseku 3.1.1.3. ...

7. 16 kalibračných kriviek vzťahujúcich sa na vzorky,

8. jedna celková kalibračná krivka,

9. predpokladaný interval celkovej kalibračnej krivky,

10. odchýlka indukovaná matricou (smat),

11. odchýlka indukovaná pokusom (srun),

12. vplyv individuálnych faktorov na výsledky merania.

Tieto pracovné charakteristiky dovoľujú úplne vyhodnotiť pracovnú hladinu metódy, pretože sa ...

3.1.3.2. Silová krivka

Silová krivka poskytuje informácie o detekčnej schopnosti metódy vo vybranom rozsahu koncentrácie. ...

(screening, konfirmácia) alebo typy (kvalitatívne alebo kvantitatívne).

Obrázok 1

Silová krivka

Obrázok 1 ukazuje príklad grafického stanovenia detekčnej schopnosti (CCß) analytickej metódy. ...

3.1.3.3. Reprodukovateľnosť

Určenie reprodukovateľnosti metódy pomocou koncepcie jednotlivých laboratórnych štúdií (vnútrolaboratórna ...

3.2. Grafická podoba rôznych analytických limitov

Obrázok 2

Látky, pre ktoré nie je ustanovený povolený limit

XS – priemerná hodnota odozvy kontaminovanej vzorky

SB – smerodajná odchýlka slepej vzorky (determinovaná za podmienok vnútrolaboratórnej reprodukovateľnosti) ...

SS – smerodajná odchýlka kontaminovanej vzorky (determinovaná za podmienok vnútrolaboratórnej ...

α – miera falošne nezhodných výsledkov

ß – miera falošne zhodných výsledkov

CCα – odozva s udanou α chybou a 50 % β chybou

CCβ – odozva s veľmi malou α chybou a β chybou

Obrázok 3

Látky s ustanoveným povoleným limitom

XB – priemerná koncentrácia slepej vzorky

XPL – priemerná koncentrácia vo vzorke obsahujúcej analyt v povolenom limite

XS – priemerná koncentrácia kontaminovanej vzorky

SPL – smerodajná odchýlka vzorky obsahujúcej analyt v povolenom limite(determinovaná za podmienok ...

SS – smerodajná odchýlka kontaminovanej vzorky(determinovaná za podmienok vnútrolaboratórnej ...

α – miera falošne nezhodných výsledkov

ß – miera falošne zhodných výsledkov

CCα – odozva s udanou α chybou a 50 % β chybou

CCβ – odozva s veľmi malou α chybou a β chybou

3.3. Príklad výpočtu pre testovanie robustnosti malých zmien podľa prístupu Youdena (16)

Porovnanie priemerov A

AA = ∑(Ai)/4

AB = ∑(Bi)/4

AC = ∑(Ci)/4

AD = ∑(Di)/4

AE = ∑(Ei)/4

AF = ∑(Fi)/4

AG = ∑(Gi)/4

Aa = ∑(ai)/4

Ab = ∑(bi)/4

Ac = ∑(ci)/4

Ad = ∑(di)/4

Ae = ∑(ei)/4

Af = ∑(fi)/4

Ag = ∑(gi)/4

Porovnanie priemerov veľkých písmen (AA do AG) s priemermi s nimi korešpondujúcimi malými písmenami ...

Robustná metóda nemá byť ovplyvnená zmenami stretávajúcimi sa takmer určite medzi laboratóriami. ...

Ak nie je významný rozdiel, najrealistickejší stupeň náhodných chýb je daný siedmimi rozdielmi: ...

Rozdiely (Di)

Da = A – a = ∑(Ai) – ∑(ai)

Db = B – b = ∑(Bi) – ∑(bi)

Dc = C – c = ∑(Ci) – ∑(ci)

Dd = D – d = ∑(Di) – ∑(di)

De = E – e = ∑(Ei) – ∑(ei)

Df = F – f = ∑(Fi) – ∑(fi)

Dg = G – g = ∑(Gi) – ∑(gi)

Druhá mocnina rozdielov (Di2)

Da2 = hodnota a

Db2 = hodnota b

Dc2 = hodnota c

Dd2 = hodnota d

De2 = hodnota e

Df2 = hodnota f

Dg2 = hodnota g

Smerodajná odchýlka rozdielov Di (SDi)

Ak SDi je významne väčšie ako smerodajná odchýlka metódy uskutočnenej za podmienok vnútrolaboratórnej ...

3.4. Príklady výpočtu pre vnútrolaboratórny postup validácie

Príklady a výpočty pre vnútrolaboratórny validačný protokol, ako je opísané pod validáciou ...

3.5. Príklady pre metódu štandardného prídavku

Testovaná vzorka s obsahom analytu T je rozdelená na dve skúšobné dávky 1 a 2 alebo hmoty m1 a ...

Ak sa predpokladá, že rc a b sú rovnaké pre analyt v natívnej vzorke a v obohatenej vzorke, potom ...

T = x1.V1.ρA.VA / (x2.V2.m1-x1.V1.m2)

Metóda dovoľuje určenie výťažnosti. Potom prídavok s opísaným postupom, časť extraktu dávky ...

rc = x2.V1.V2.ρB.VB / [x3.V1.V3(T.m2 + ρA.VA) - x2.V2.T.m1(V3-VB)]

Okrem toho je možné vypočítať citlivosť b ako :

b = x1.V1 / rc.T.m1

Boli opísané všetky podmienky použitia a detaily (18).

4. Použité skratky

AAS – atómová absorbčná spektrometria

AES – atómová emisná spektrometria

AOAC–I – Asociácia oficiálnych analytických chemikov - medzinárodná

B – viazaná frakcia (imuno postupy)

CI – chemická ionizácia

CRM – Certifikovaný referenčný materiál

CV – variačný koeficient

2 D – dvojrozmerný

DAD – detektor diódového poľa

DPASV – diferenčná pulzná anodická strippová voltametria

ECD – detekcia záchytu elektónu

EI – elektónová nárazová ionizácia

GC – plynová chromatografia

HPLC – vysokoúčinná kvapalinová chromatografia

HPTLC – vysokoúčinná tenkovrstvová chromatografia

HRMS – vysokorozlišovacia (hmotnostná spektrometria)

ICP-AES – atómová emisná spektrometria s indukčne viazanou plazmou

ICP-MS – hmotnostná spektrometria s indukčne viazanou plazmou

IR – infračervené

ISO – Medzinárodná organizácia pre normalizáciu

LC – kvapalinová chromatografia

LR(MS) – nízkorozlišovacia (hmotnostná spektrometria)

MRPL – minimum požadovaných pracovných limitov

MS – hmotnostná spektrometria

m/z – pomer hmota/náboj

RF – relatívna migrácia k čelu rozpúšťadla (TLC)

RSDL – relatívne smerodajné odchýlky laboratória

SIM – selektovaný monitoring iónov

TLC – chromatografia na tenkej vrstve

UV – ultrafialové svetlo

VIS – viditeľné svetlo

Príloha č. 9

k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

Prevziať prílohu - Vzor 09-1 ...

Príloha č. 10

k nariadeniu vlády č. 320/2003 Z. z.

Prevziať prílohu - Vzor 10-1 ...